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傳代細胞的傳代方法及操作過程實驗原理傳代培養是指細胞從一個培養瓶以1：2或1：2以上的比例轉移，接種到另一培養瓶的培養。這種培養，*步也是制備細胞懸液，當細胞長成致密單層時，它很容易被蛋白水解酶和EDTA）所破壞。所以—般采用胰蛋白酶和EDTA（乙二胺四乙酸鹽）的混合物，做為消化液。細胞培養是一種操作繁瑣而又要求十分嚴謹的實驗技術。要使細胞能在體外長期生長，必須滿足兩個基本要求：一是供給細胞存活所必需的條件，如適量的水、無機鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖及其有關的生長因子、氧氣、...

李斯特菌（也稱李氏桿菌）引起的急性傳染病，以敗血病為主要癥狀，伴有內臟器官和中樞神經系統病變。李斯特菌是1926年英國南非裔科學家穆里在病死的兔子體內發現的，為紀念近代消毒手術之父、英國生理學家約瑟夫·李斯特（1827～1912），1940年被第三屆微生物學大會命名為李斯特菌。單核細胞增生李斯特氏菌是一種人畜共患病的病原菌。它能引起人畜的李氏菌的病，感染后主要表現為敗血癥、腦膜炎和單核細胞增多。它廣泛存在于自然界中，食品中存在的單增李氏菌對人類的安全具有危險，該菌在4℃的環境...

培養細胞的常規檢查和觀察方法細胞培養后,需要對其生長狀況、形態甚至生物學性狀連續地進行觀察.由于細胞小而復雜,若不借助適當的手段,則難以觀察期形態、結構,更難發現細胞內各種組分的分子組成及功能.目前,已有多種研究細胞的技術,從光學顯微鏡到電子顯微鏡,從一般細胞化學法到免疫化學法.細胞培養后,需要對其生長狀況、形態甚至生物學性狀連續地進行觀察.由于細胞小而復雜,若不借助適當的手段,則難以觀察期形態、結構,更難發現細胞內各種組分的分子組成及功能.目前,已有多種研究細胞的技術,從光...

上皮細胞的培養方法上皮細胞的培養方法上皮細胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮組織,故上皮細胞培養特別受到重視.但上皮細胞培養中常混雜有成纖維細胞,培養時生長速度往往超過上皮細胞,并難以純化,同時上皮細胞難以在體外長期生存,因此純化和延長生存時間是培養關鍵.體內上皮細胞生長在膠原構成的基膜,因此培養在有膠原的底物上可能利于生長,另外人或小鼠表皮細胞培養在以3T3細胞為飼養層（用射線照射后）時,細胞易生長并可發生一定程度的分化現象.降低PH、Ca...

細胞的復蘇及凍存方法一.細胞復蘇與培養將液氮或-80℃保存的腫瘤細胞于37℃水浴，快速溶化，用8.0ml培養基混勻已融化的腫瘤細胞懸液，于1500轉/分，離心3分鐘。棄上清，再吸取8.0ml培養基質混勻細胞沉淀，再1500轉/分，離心3分鐘，棄上清，細胞沉淀用1.0ml培養基混勻，備用。另取一個75cm2方瓶，加入14.0ml培養基質，將上述制備的含腫瘤細胞懸液（1.0ml）加入此方瓶中，于37℃，5%CO2孵育箱中培養。若此腫瘤細胞懸浮生長，大約3－4天細胞基質會變黃，5....

微生物菌種冷凍干燥和液氮保藏菌種技術－、安瓶管開封1．用浸過70％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管。2．用火焰將安瓿管頂端加熱。3．滴無菌水至加熱的安瓿管頂端使玻璃開裂。4．用挫刀或鑷子敲下已開裂的安瓿管的頂端。二、菌株恢復培養1．用無菌吸管，吸取0.3～0.5ml適宜的液體培養基，滴人安瓿管內，輕輕振蕩，使凍于菌體溶解呈懸浮狀。2．取0.1～0.2ml菌體懸浮液，移植于適宜的瓊脂斜面／平板培養基上，剩余的菌液，注入適宜的液體培養基內，然后在建議的溫度下培養。3．若未能活化，或活化后有...

大腸桿菌一般培養方法使用牛肉膏蛋白胨培養基組成成分：牛肉膏3g,蛋白胨10g,Nacl5g,瓊脂15～20g,水1000mL,PH7.4～7.6。具體配置步驟：1.稱藥品按實際用量計算后,按配方稱取各種藥品放入大燒杯中.牛肉膏可放在小燒杯或表面皿中稱量,用熱水溶解后倒入大燒杯;也可放在稱量紙上稱量,隨后放入熱水中,牛肉膏使與稱量紙分離,立即取出紙片.蛋白胨極易吸潮,故稱量時要迅速.2.加熱溶解在燒杯中加入少于所需要的水量,然后放在石棉網上,小火加熱,并用玻棒攪拌,待藥品*溶解...

細胞傳代的一般方法開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細胞（單層細胞，鏡檢適合）、培養液（MEM-0.2%LH培養液或MEM培養液或199等適合細胞有要求的培養液）、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（1萬單位）、7.5％NaHC03溶液、0.25％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶（100m1）、克氏瓶、膠塞、吸管（10ml、1m1）、細胞吹打管（20ml）（以上用具需經121℃至少15分鐘高壓滅菌）C02孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、—20℃冰...